在建立方法時(shí),改變流動(dòng)相的pH值是一個(gè)非常有效的工具,尤其在分離一些中性胺類化合物或者在堿性條件下分離其他的有機(jī)堿類化合物。
盡管近年來(lái)有宣稱硅膠基C18色譜柱在堿性pH條件下能夠穩(wěn)定工作,但是所有的硅膠基C18色譜柱在pH>6是測(cè)量性能均有所下降,相比在理想條件下使用,色譜柱的使用壽命也顯著縮短。
另一方面,聚合物基質(zhì)色譜柱具有真正的pH值穩(wěn)定性和化學(xué)穩(wěn)定性,固定相能夠長(zhǎng)期耐受濃度高達(dá)1M的NaOH和H,SO,,且測(cè)量性能不會(huì)下降。因?yàn)樵谌魏蝡H值下不會(huì)出現(xiàn)填料脫落,滲出或溶解現(xiàn)象,所以色譜柱無(wú)需考慮流動(dòng)相狀況在整個(gè)使用壽命內(nèi)均可可靠地重復(fù)檢測(cè)。
高pH值的應(yīng)用
目前超過(guò)70%的藥物成分為陽(yáng)離子溶質(zhì),在pH<7時(shí),攜帶正電荷,過(guò)去一直很難將其與其他有機(jī)堿分離。主要是因?yàn)殡x子化在反相色譜法中起決定性作用,電離胺樣品的洗脫窗口十分狹窄;其次帶正電荷的溶質(zhì)和色譜柱固定相上殘余的硅醇基發(fā)生第二次相互作用,常常導(dǎo)致出現(xiàn)峰值形狀不佳,保留時(shí)間出現(xiàn)漂移和柱效降低等異常現(xiàn)象,更進(jìn)一步縮短色譜柱使用壽命。而PRP-C18可以解決這些問(wèn)題.
快速洗脫
在現(xiàn)代藥物研發(fā)科學(xué)中,常規(guī)分析色譜不應(yīng)該成為瓶頸。趨勢(shì)是使用包含較小顆粒的較短色譜柱并在較高流速下使用,從而提高生產(chǎn)率。